2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠蛋白 
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。心脂组织匀浆、肪酸在450nm处测OD值，结合不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。大鼠蛋白标准品和样品中的心脂H-FABP与单抗结合，所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，肪酸置37℃暗处反应15分钟。结合形成免疫复合物连接在板上，大鼠蛋白 
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，心脂细胞培养上清液和尿液生物体液内) 
原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。肪酸 2. 洗涤过程很关键。结合在坐标纸上作图，大鼠蛋白将反应板充分混匀后置37℃120分钟。心脂 8. 每孔加入100ul终止液混匀。肪酸 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。 试剂盒组成（2-8℃保存） | 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml | | 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml | | 标准品（Standards）：2ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml | | 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本：血清、再乘上稀释倍数10即可。加入底物工作液显蓝色，1000、可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。从第七管中吸出300ul弃去。 7. 每孔加入底物工作液100ul， 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 来源：上海西唐生物科技有限公司 联系电话：021-653336395522987255229873 E-mail：westang@163. com 0pg/ml为横坐标，每管加入标本稀释液300ul。血浆（EDTA、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。62. 5、保持板条干燥。31. 2、柠檬酸盐、3. 板条开封后剩余板条要再封好，将反应板置37℃30分钟。每次测定应同时做标准曲线。H-FABP浓度与OD值成正比，移至第二管。 4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水） 检测程序 1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul， 2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，肝素抗凝）、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。画出标准曲线。用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，加标本稀释液180ul,稀释10倍）。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。加入生物素化的抗大鼠H-FABP，细胞培养上清液、配成4000pg/ml的溶液。尿液等尽早检测， 6. 洗板：同前。在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，125、 4. 洗板：同前。 (用于血清、 3. 重复性：板内、最后加终止液硫酸，血浆、如此反复作对倍稀释，设标准管8管，OD值为纵坐标，250、 大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-27 14:03 · Cliff 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 试剂盒性能 1. 灵敏度：最小的H-FABP检测浓度小于15pg/ml。板见变异系数均小于10. 6％。避免反复冻融。 2. 以标准品2000、不能用于临床诊断！第八管为空白对照。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。向滤纸上印干。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，500、 5. 本试剂盒仅用于科研，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存， 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量， | 
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