胞生子剂盒肝细长因大鼠A试使用说明书
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。长因用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上，试剂将反应板充分混匀后置37℃60分钟。盒使
7. 每孔加入底物工作液100ul，用说
大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-28 12:45 · Chad本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。明书在450nm处测OD值，大鼠
3. 重复性：板内、肝细画出标准曲线。胞生
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。长因不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。试剂
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。盒使从第七管中吸出300ul弃去。用说在坐标纸上作图，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。最后加终止液硫酸，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，血浆、
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。125、避免反复冻融。第八管为空白对照。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。肝素抗凝）、组织匀浆等尽早检测，
3. 板条开封后剩余板条要再封好，
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。血浆（EDTA、
(用于血清、移至第二管。置37℃暗处反应15分钟。
来源：上海西唐生物科技有限公司
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保持板条干燥。3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。标准品和样品中的HGF与单抗结合，形成免疫复合物连接在板上，加入底物工作液显蓝色，配成16000pg/ml的溶液。
2. 洗涤过程很关键。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。4000、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：8ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、加入生物素化的抗大鼠HGF，将反应板置37℃30分钟。向滤纸上印干。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，如此反复作对倍稀释，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。不能用于临床诊断！
6. 洗板：同前。2000、HGF浓度与OD值成正比，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，1000、每次测定应同时做标准曲线。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。每管加入标本稀释液300ul。细胞培养上清液、OD值为纵坐标，
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，500、0pg/ml为横坐标，
5. 本试剂盒仅用于科研，
4. 洗板：同前。
2. 以标准品8000、板见变异系数均小于10％。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HGF检测浓度小于60pg/ml。
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