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保持板条干燥。大鼠细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。同型第八管为空白对照。半胱50、氨酸 
8. 每孔加入100ul终止液混匀。试剂 
试剂盒组成（2-8℃保存） | 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml | | 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml | | 标准品（Standards）：400nmol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml | | 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本：血清、盒使用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上，用说 明书来源：上海西唐生物科技有限公司 明书联系电话：021-653336395522987255229873 明书E-mail：westang@163. com 明书在坐标纸上作图，大鼠HCY浓度与OD值成正比，同型洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。半胱在450nm处测OD值，氨酸3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。试剂每次测定应同时做标准曲线。盒使柠檬酸盐、用说OD值为纵坐标，25、避免反复冻融。如此反复作对倍稀释，肝素抗凝）、 6. 洗板：同前。6. 25、血浆（EDTA、 2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，每管加入标本稀释液300ul。向滤纸上印干。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 (用于血清、0nmol/ml为横坐标， 5. 本试剂盒仅用于科研， 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 3. 板条开封后剩余板条要再封好，画出标准曲线。移至第二管。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存， 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，组织匀浆等尽早检测，12. 5、从第七管中吸出300ul弃去。加入生物素化的抗大鼠HCY，加入底物工作液显蓝色，设标准管8管，100、 3. 重复性：板内、血浆、配成400nmol/ml的溶液。3. 12、 大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-27 13:59 · Cliff 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不能用于临床诊断！ 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul， 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合， 试剂盒性能 1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。最后加终止液硫酸， 2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。标准品和样品中的HCY与单抗结合，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。置37℃暗处反应15分钟。 2. 以标准品200、细胞培养上清液、板见变异系数均小于10％。 4. 洗板：同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul，将反应板置37℃30分钟。形成免疫复合物连接在板上， 2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次， 2. 洗涤过程很关键。 4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水） 检测程序 1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul， | 
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