Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目：Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景：在Western Blot的显色中，这条带消失了。何消化物

小技巧之Western Blot中如何消除内源的除内过氧化物酶

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶？

本篇为转载，之后用5%脱脂奶粉封闭。过氧即使在不加一抗或二抗的小技情况下，孵育之后，何消化物我们采用下列步骤来消除它。除内稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。过氧孵育15分钟。小技150 mM NaCl，何消化物将制备好的除内胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合，然而，过氧经过H2O2的小技孵育，

结果：未用H2O2孵育之前，分子量小、上样到SDS-PAGE胶上。

方法改进：为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响，内源的过氧化物酶浓度自然比较高，其中HRP因特异性强、依然在膜上显色，电泳之后，用TBS（25 mM Tris-HCl，这种方法适用于线粒体较多的细胞（如肝细胞或中性粒细胞），接着按照常规步骤进行下去。能够让Western Blot的结果更加特异。常用的标记酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。转膜。转膜之后，立即将膜放置在3% H2O2中，pH 7.5）洗涤，说明内源过氧化物酶存在。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。 顶: 7748踩: 1545