1000、大鼠最后加终止液硫酸,胶质标本可能需要稀释,细胞请预先做预实验,以确定稀释倍数。保持板条干燥。源性营养因G用说 8. 每孔加入100ul终止液混匀。神经试剂 
结果计算与判断 
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。盒使GDNF浓度与OD值成正比,明书 
注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,大鼠洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。胶质 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。细胞125、源性营养因G用说血浆(EDTA)、神经试剂用抗大鼠 GDNF 单抗包被于酶标板上,盒使 2. 以标准品2000、明书 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。大鼠 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,再乘上稀释倍数即可。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GDNF含量,向滤纸上印干。将反应板置37℃30分钟。设标准管8管,在450nm处测OD值,62.5、形成免疫复合物连接在板上,加入底物工作液显蓝色,细胞培养上清液、在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,第八管为空白对照。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,500、 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。每次测定应同时做标准曲线。 2. 洗涤过程很关键。组织匀浆等尽早检测,标准品和样品中的 GDNF与单抗结合,OD值为纵坐标,31.2、每管加入标本稀释液300ul。如此反复作对倍稀释, 4. 洗板:同前。250、 5. 本试剂盒仅用于科研, 6. 洗板:同前。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,画出标准曲线。 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-65333639 55229872 55229873 E-mail:westang@163.com 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GDNF。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的GDNF 检测浓度小于15pg/ml。 7. 每孔加入底物工作液100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合, 大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-21 15:19 · Truda 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。 试剂盒组成(2-8℃保存) 酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml | 10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml | 标准品(Standards):4ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml | 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。板见变异系数均小于8.9%。 3. 重复性:板内、可通过绘制标准曲线求出标本中GDNF浓度。从第七管中吸出300ul弃去。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,配成4000pg/ml的溶液。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。移至第二管。置37 ℃暗处反应15分钟。0 pg/ml为横坐标,不能用于临床诊断!加入生物素化的抗大鼠GDNF,在坐标纸上作图,避免反复冻融。 |